乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）慢性感染及所致肝臟疾病是嚴重危害人類健康的全球性公共衛生問題。機體免疫系統識別HBV所引發的肝臟炎症反應和纖維化改變是慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）進展為肝硬化甚至肝細胞癌的重要原因。HBV慢性感染過程中誘導機體免疫反應發生的確切觸發機製尚未完全闡明。單核細胞作為重要天然免疫細胞，同時是外周循環中攝取HBsAg的主要抗原遞呈細胞。研究團隊一直聚焦於HBsAg與機體天然免疫系統相互作用機製，發現HBsAg通過調控單核細胞免疫功能，誘導非特異性炎症反應並耗竭病毒特異性T細胞效應，實現有利於病毒持續感染的免疫環境(1-3)。然而，HBsAg作用於單核細胞發揮多方面效應作用的具體機製仍不清楚。
近日，MK体育袁正宏/澳大利亞堪培拉大學張小楠/蘇州大學附屬傳染病醫院朱莉團隊以“Modulation of Monocyte Activity by Hepatocellular MicroRNA Delivery via Hepatitis B Virus Surface Antigen Particles: Implications for Pathobiology of Chronic Hepatitis B”為題，在Hepatology發表了HBsAg亞病毒顆粒功能性傳遞肝細胞miRNAs的最新研究成果。該研究首次證實HBsAg亞病毒顆粒具有載體功能可介導肝細胞miRNAs進入單核細胞，免疫調節性miRNAs中的miR-939選擇性激活MAPK p38信號通路增強IL-8表達，HBsAg-miR-939-IL-8信號軸與HBV慢性感染所致肝臟疾病進程密切相關(4)。
首先，研究團隊收集了110例未接受治療的CHB患者，利用qRT-PCR技術檢測了血漿和HBsAg顆粒中29種miRNAs的表達水平，同時采用ELISA方法檢測了血漿中18種細胞因子水平。聚類分析結果顯示，血漿/HBsAg的miRNAs表達譜分成兩個主要簇：肝特異性miRNAs與HBsAg水平呈極顯著正相關，提示HBsAg攜帶肝細胞來源miRNAs進入外周循環；免疫調節性miRNAs與炎性細胞因子及ALT等呈明顯聚類，提示免疫調節性miRNAs參與肝臟炎症反應。進一步研究證實HBsAg攜帶的miR-939與IL-8呈顯著聚類，並且二者表達水平相關性最為顯著（r=0.3039）。
研究團隊進一步利用多種實驗體系證實HBsAg亞病毒顆粒能夠介導特異性miRNAs進入單核細胞。1）利用Cy3-miRNAs mimic轉染CHO-HBsAg細胞系，采用流式細胞術和qRT-PCR方法證實HBsAg介導miRNAs進入單核細胞。2）利用Cy3-miRNA mimic轉染HepG2.117細胞，並用培養上清孵育單核細胞，采用共聚焦顯微鏡觀察到HBsAg能夠包裹攜帶肝細胞來源miRNAs進入單核細胞。3）比較CHB患者和健康誌願者外周循環單核細胞中肝特異性miRNAs水平，發現CHB患者單核細胞中肝特異性miRNAs顯著高於健康誌願者。
接下來，研究團隊利用特異性miRNAs電轉HBsAg亞病毒顆粒實驗體系，分別研究免疫調節性miRNAs對單核細胞分泌細胞因子功能影響，最終發現miR-939能夠特異性激活單核細胞MAPK p38信號通路進而誘導IL-8生成，HBsAg亞病毒顆粒不僅發揮載體傳遞作用，同時能夠協同增強p38-IL-8信號通路。
最後，研究團隊通過收集HBV慢性感染相關進展性肝臟疾病隊列（107例），證實miR-939和IL-8在進展性肝臟疾病中與肝臟炎症/纖維化分期表達趨勢一致，並且二者表達水平呈顯著正相關（r=0.3553）。
綜上所述，該研究首次證實HBsAg亞病毒顆粒攜帶miR-939並能夠特異性激活單核細胞MAPK p38信號通路進而誘導IL-8分泌，在CHB自然感染隊列和進展性肝臟疾病隊列中，miR-939和IL-8均呈顯著正相關，同時與肝臟炎症標誌物密切相關。研究結果揭示，HBsAg-miR-939-IL-8信號通路可能在HBV慢性感染相關肝臟炎症損傷和進展性肝臟疾病進程中發揮關鍵調控作用。
MK体育袁正宏教授、澳大利亞堪培拉大學張小楠教授和蘇州大學附屬傳染病醫院朱莉主任是該研究論文的通訊作者，蘇州大學附屬傳染病醫院李晉博士、蘇州大學附屬第一醫院馬驍博士和宣勤考主治醫師為該論文的共同第一作者。這項工作得到了MK体育平台聞玉梅院士、上海市公共衛生臨床中心陳良副主任、蘇州大學附屬傳染病醫院朱傳武院長等專家的支持和幫助，該研究得到國家重點研發計劃、國家自然科學基金及江蘇省社會發展面上項目等資助。
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